穿心莲注射液含量测定方法的改进

jz066520 · 发表于 2014-6-2 18:42:58

【摘要】  目的：建立高效液相色谱法测定穿心莲注射液中穿心莲内酯的含量方法。方法：色谱柱：KromasilC18(250mm×4.6mm，5μm)，流动相：甲醇水(52:48)，检测波长：225nm，流速为1ml﹒min-1。结果：穿心莲内酯的回归方程为：Y=12734.9x+313618, г=0.9999(n=6)，线性范围为：50.62μg/ml～506.2μg/ml，平均回收率为100.04%，RSD为0.71%(n=5)。本法与标准法比较，没有显著性差别。结论：方法简便，结果准确，专属性强，可用于穿心莲注射液含量的测定。

【关键词】  HPLC法; 穿心莲注射液; 穿心莲内酯

　穿心莲注射液是由穿心莲药材经加工制成的注射液。主要用于咽喉肿痛，肺热咳嗽，热痢，亦可用于上呼道感染，细菌性痢疾等。其质量标准收载于卫生部药品标准[1]。现质量标准采用制备标准曲线的方法以穿心莲内酯计其穿心莲总内酯的含量。本研究参照《中国药典》[2]穿心莲项下的含量测定方法，采用HPLC法以穿心莲内酯计其穿心莲总内酯的含量，对穿心莲注射液进行含量测定。实验结果表明，本法简便、快速、准确实用、专属性强、实用性好，与标准法比较，结果满意，可用于含量的测定。

　　1 仪器与试药

　　LC10ATvp型高效液相色谱仪(日本岛津)，SPD10Avp型紫外检测器，N2000型色谱数据工作站，普利赛斯电子分析天平。穿心莲内酯对照品(批号：110797200307，中国药品生物制品检定所)，穿心莲注射液(市售品)，甲醇为色谱纯，水为重蒸馏水。

　　2 方法与结果

　　2.1 色谱条件

　　色谱柱：KromasilC18(250mm×4.6mm，5μm);流动相：甲醇水(52:48);检测波长：225nm;流速：1ml·min-1;柱温：室温。理论塔板数按穿心莲内酯峰计算不低于2000;分离度大于1.5。色谱图见附图。

　　2.2 线性关系

　　精密称取穿心莲内酯对照品101.23mg，置于100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为储备液。精密量取储备液0.5，1，2，3，4，5ml分别置于10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，按上述色谱条件，分别取20μl进样，以峰面积Y对对照品进样量(μg·ml-1)作线性回归。结果回归方程(n=6)为：Y=12734.9x+313618, г=0.9999线性范围为：50.62μg/ml～506.2μg/ml 。

　　2.3 重复性实验

　　精密量取2.00ml同一批号样品(批号：09082603)6份，按样品测定项下的方法，测定穿心莲内酯的含量，RSD为0.79%。空白溶液色谱图对照品溶液色谱图供试品溶液色谱图

　　2.4 稳定性实验

　　取重复性实验中的第1份溶液，室温下在0、1、2、3、4小时测定，结果表明，本品的供试品溶液在室温4小时内基本稳定，RSD=0.67%，n=5。2.5 精密度试验

　　取线性关系考察中的穿心莲内酯浓度为202.46μg/ml的对照品溶液，重复进样5次，结果RSD为0.96%。

　　2.6 加样回收实验

　　精密量取1.00ml已知含量的穿心莲注射液5批，分别置于100ml量瓶中，再分别精密加入线性关系中对照品储备液5.00ml，加甲醇稀释至刻度，摇匀，照样品测定项下的方法测定加样回收率，结果见表1。表1 回收率测定结果表

　　2.7 样品含量的测定

　　精密量取本品2.00ml，置中性氧化铝柱(200～300目，5g，内径1.5cm)上，用甲醇80ml洗脱，收集洗脱液于100ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml于50ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，按上述色谱条件，取20μl进样测定，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，测得结果与国家药品标准[1]方法比较，结果见表2。表2 穿心莲注射液含量测定结果表

　　3 讨论

　　检测波长、流动相和样品的预处理均参照《中国药典》[2]穿心莲项下的含量测定方法，峰形和分离度都比较满意。

　　标准方法需绘制标准曲线，操作繁琐，样品预处理也比较麻烦。本研究采用高效液相色谱法测定，操作简单，结果准确，与标准方法比较无明显差异，可用于含量的控制，为药品标准的修改提供了一定的参考。

【参考文献】
  　1 卫生部药品标准，中药成方制剂第19册，1998,129.

　　2 中国药典.一部.2005,189.

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