RPHPLC法测定丹参舒心胶囊中丹酚酸B的含量

jz066520 · 发表于 2014-6-2 21:07:08

【摘要】  采用RPHPLC法测定丹参舒心胶囊中丹酚酸B的含量。固定相为Kromasil C18反相柱;流动相为乙腈甲醇甲酸水(10∶30∶1∶59);检测波长为286nm;流速为：1.0 ml/min 。结果显示，对丹酚酸B的平均回收率为 100.05%，RSD=0.38%(n=9),r=0.9998。

【关键词】  反相高效液相色谱法; 丹参舒心胶囊; 丹酚酸B

丹参舒心胶囊为丹参提取物制成的胶囊剂,具有活血化瘀、镇静安神之功效，临床上主要用于治疗冠心病引起的心绞痛、胸闷及心悸等。其收载于卫生部药品标准中中药成方制剂第7册。标准中没有含量测定的记载。本实验采用高效液相色谱法对丹酚酸B进行了测定，结果表明本法专属性强，重现性好，可作为含量测定的质控指标之一。

　　1 材料与制备

　　1.1 仪器与试药

　　LC10ATVP型高效液相色谱仪(日本岛津);SPD10AVP型紫外检测器;N2000型色谱数据工作站;92SM202ADR电子分析天平;V530型紫外分光光度计;丹酚酸B对照品(中国药品生物制品检定所，批号111562200807);丹参舒心胶囊 (市售品，河南辅仁堂制药有限公司)。乙腈、甲醇、甲酸为色谱纯，水为纯化水。

　　1.2 色谱条件

　　色谱柱：Kromasi C18反相柱(4.6 mm×250mm，5μm);柱温：室温;流动相：乙腈甲醇甲酸水(10∶30∶1∶59);检测波长为286nm;进样量10μl;理论塔板数按丹酚酸B峰计算不低于4000; 分离度大于1.5。

　　1.3 对照品溶液的制备

　　精密称取丹酚酸B对照品3.93mg，置于50ml棕色量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，作为贮备液，精密量取2 ml置于50ml棕色量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得对照品溶液。

　　1.4 供试品溶液的制备

　　精密量取本品 10粒除去囊壳精密称定，研细，取0.3g，精密称定，置于50ml量瓶中，加水适量，超声处理30分钟，放冷，加水至刻度，摇匀，离心，取上清液，即得。

　　2 方法与结果

　　2.1 线性关系考察

　　精密量取对照品贮备液0.5、1.0ml、1.5ml、2.0ml、2.5ml、3.0ml，分别置于25ml棕色量瓶中，加水稀释至刻度，按上述色谱条件，取10μl进样，记录色谱图，以峰面积Y为纵坐标，对照品进样量(μg/ml)为横坐标，进行线性回归。方程(n=6)为Y=24508.2x-4807，r=0.9998，线性范围为2.003μg/ml～28.026μg/ml 。

　　2.2 精密度试验

　　取线性关系考察丹酚酸B浓度为1.5365mg的照品溶液，按上述色谱条件连续进样5次，RSD为1.32%。

　　2.3 重现性实验

　　取同一批丹参舒心胶囊样品制备6份，按上述色谱条件　2.4 重复性试验

　　取同一批号的样品(约相当于丹参舒心胶囊3粒)5份精密称定，按样品测定项下的方法测定丹酚酸B的含量 ,平均含量为0.2026mg/粒。

　　2.5 加样回收率试验

　　按处方比例称取各辅料及其他组份适量，分别加入处方量的80%、100%、120%丹酚酸B对照品3份，混匀，精密称取上述细粉各3份，照样品测定项下的方法测定回收率结果见表1。表1 加样回收率试验结果

　　2.6 样品含量的测定

　　精密称取样品，按上述色谱条件进样，用外标法以峰面积计算，结果见表2。表2 5批不同样品的测定结果

　　3 讨论

　　3.1 检测波长的选择

　　丹酚酸B在285nm～288nm波长范围内有吸收，通过紫外分光光度法对吸收度的测定，在286nm的波长有最大吸收，故选用286nm为检测波长。

　　3.2 流动相的选择

　　在该实验中，曾选用乙腈甲醇水体系作为流动相，但柱压太大，对色谱柱有损伤，后改用乙腈甲醇甲酸水体系为流动相，通过调节不同比例的流动相实验，结果表明，以乙腈甲醇甲酸水(10∶30：1：59)为流动相分离度好(R>1.5),而且保留时间适宜。

　　3.3 试验结果表明

　　本法重复性好，回收率和精密度均较高，且操作简单，完全可以作为丹参舒心胶囊中丹酚酸B的含量测定，可以作为丹参舒心胶囊的质控指标之一。

【参考文献】
  　1国家药典编委会.中国药典，2005年版(一部).北京:化学工业出版社，2005.

　　2 国家药典编委会.《卫生部药品标准》中药成方制剂第7册.北京:化学工业出版社，1993.

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