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[药学] 虎杖不同酒制品大黄素及大黄酸含量比较

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发表于 2014-8-19 22:02:58 | 显示全部楼层 |阅读模式
【摘要】  目的探讨酒制对虎杖中大黄素和大黄酸的影响。方法采用高效液相色谱法对其不同酒制品进行含量测定。结果不同酒制品中大黄素含量由高到低的顺序为:酒润品>酒煮品>酒炒品,大黄酸含量则相近。结论不同酒制方法及炮制温度对大黄素含量有一定影响。

【关键词】  虎杖 炮制 大黄素 大黄酸 高效液相色谱

  Abstract:ObjectiveTo investigate the  effects of the different wine processing method on the contents of emodin and  rhein in Rhizoma Polygoni Cuspidati. MethodsThe determinations of emodin and rhein were carried out  by HPLC. ResultsThe emodin content in Rhizoma Polygoni Cuspidati changed as follows: sample baked with wet wine > sample baked with boiled wine>sample baked with fried wine. ConclusionThe different wine processing  methods and temperature have  effects on the contents of emodin of Rhizoma Polygoni Cuspidati.

  Key words:Rhizoma Polygoni Cuspidati;  Processing method;  Emodin;  Rhein;  HPLC

    虎杖为常用中药,来源于蓼科植物虎杖Polygonum   cuspidatum   Sieb.et  Zucc.(P.reynoutria  Makino, Reynoutria  japonica  Houtt.)的干燥根茎及根。其性微苦,微寒。归肝、胆、肺经。具有祛风利湿,散淤定痛,止咳化痰等功效。用于治疗关节痹痛,湿热黄疸,经闭,癥瘕,水火烫伤,跌扑损伤,痈肿疮毒,咳嗽痰多等症[1]。虎杖的酒制法最早见于宋·《太平圣惠方》:“月水不利。虎杖三两,凌霄花、没药一两为末,热酒每服一钱。又方:治二斗,水一觚,浸虎杖一宿,煎取二斗,入二汁,同煎如铴。每酒服一合……”[2]。明代仍沿用前人的经验,李时珍编撰《本草纲目》曰:“治产后淤血血痛,及坠扑昏闷:虎杖根,酒研末服[3]”。现代酒制记载有“取虎杖根,细剉,以酒浸泡5~7 日,去渣备用”[4]。侗族酒制法则为:取净虎杖用黄酒40%浸泡30 min,用文火煮至酒被吸尽,取出,切片,干燥[5]。笔者曾对虎杖不同炮制品中主要成分大黄素进行分析,发现同等条件下酒制品中大黄素的含量略高[7],现采用高效液相色谱法对虎杖酒制品中大黄素及大黄酸进行测定,以探讨其酒制品质量。

  1  仪器与试剂

    1100高效液相色谱仪(美国安捷伦公司);LG16-W高速离心机(北京医用离心机厂);SB32002-T超声器(Shanghaibranson);对照品大黄素、大黄酸由中国药品制品检定所提供(批号分别为07562200009、0757-200206); 虎杖饮片购自广西一心药业股份有限公司,经我院何报作教授鉴定为蓼科植物虎杖Polygonum   cuspidatum   Sieb.et  Zucc.的干燥根茎;甲醇为色谱纯,其余试剂均为分析纯,黄酒(浙江绍兴)为市售品。

  2  方法与结果

  2.1  酒制品制备

  2.1.1  酒煮品取虎杖饮片100 g,加黄酒40 ml拌匀,浸泡30 min,用文火煮至黄酒被吸尽后,取出干燥粉碎过筛,备用[5]。

  2.1.2  酒炒品取虎杖饮片100 g,加黄酒15 ml拌匀,闷润1h待黄酒被吸尽后,置干锅内用文火炒至药干色泽加深,取出干燥粉碎过筛,备用[6]。

  2.1.3  酒润品取虎杖饮片100 g,加黄酒15 ml拌匀,闷润1.5 h待黄酒被吸尽后,干燥粉碎过筛,备用。

  2.2  大黄素含量测定[7]

  2.2.1  色谱条件AlltimaC18(4.6 mm×150 mm,5 μm),流动相:甲醇-0.2%磷酸(80∶20);流速:1.0 ml·min-1;检测波长:254 nm;柱温:室温;进样量:20 μl。 2.2.2  对照品溶液制备精密称取大黄素对照品2.5 mg,置25 ml量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,密塞,浓度为0.1 mg·ml-1。

  2.2.3  样品测定取各酒制品细粉,精密称定约0.1 g。分置于10 ml具塞离心管中,加入2.5 mol·L-1的硫酸5 ml,于超声器上混匀,置沸水浴中维持30 min,取出,加水4.0 ml,振荡使均匀,离心10 min,上清液经滤纸滤过,滤液弃去,滤膜连离心沉淀反复加甲醇用超声波振荡提取8次,每次加甲醇5 ml,超声波振荡5 min离心3 min,收集上清液于50 ml量瓶中定容至刻度,摇匀,取适量用离心10 min后,取上清液20 μl进样。结果见表1。

  2.3  大黄酸含量测定

  2.3.1  色谱条件AlltimaC18柱(4.6 mm×150 mm,5 μm),流动相:甲醇-0.1%磷酸(80∶15);流速:1.2 ml·min-1;检测波长:440 nm;柱温:室温;进样量:20 μl。

  2.3.2  对照品溶液制备精密称取大黄酸对照品2.62 mg,置25 ml量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,浓度为0.104 8 mg·ml-1。

  2.3.3  样品测定取各酒制品细粉,精密称定约0.1 g。分置于50 ml具塞锥形瓶中,加入30 ml甲醇,超声提取30 min,取出,过滤,收集滤液置蒸发皿中并挥干甲醇,剩液加入2 ml盐酸与10 ml水,加热水解40 min,用30 ml氯仿分3次萃取,每次10 ml,合并萃取液,回收氯仿,样品液最后收集于25 ml量瓶中,加甲醇定容至刻度,摇匀,取适量用离心10 min后,取上清液20 μl进样。结果见表1。表1  酒制品中大黄素及大黄酸含量测定结果(略)

  3  小结

    酒制品大黄素含量结果大小依次为:酒润品>酒煮品>酒炒品,大黄酸含量较少且相近。3组酒制品中经q检验检,表明酒制品中大黄素的百分含量较高的酒润品与百分含量低的酒炒品、酒煮品比较有显著性差异。

    虎杖的酒制品在临床上使用已有多年,其疗效也好于常规的润切法。酒性热,有活血通络、行药效之功。虎杖酒制后可增强其散淤定痛的功效,本实验结果表明其大黄素含量与酒制方法有密切关系,可作为考察虎杖酒制品质量实验依据之一。



【参考文献】
    [1]国家药典委员会.中国药典,Ⅰ部[S].北京:化学工业出版社,2005:167.

  [2]宋·王怀隐.太平圣惠方[M].北京:人民卫生出版社,1958:178.

  [3]明·李时珍.本草纲目[M].北京:人民卫生出版社(影印本),1957:123.

  [4]田华咏,瞿显友,熊鹏辉.中国民族药炮制集成[M].北京:中医古籍出版社,2000:285.

  [5]李明哲.药酒配方800例[M].北京:轻工业出版社,1988:139.

  [6]曹丽亚,陈贤斌.酒炒虎杖的方法介绍[J].基层中药杂志,2001,15(6):36.

  [7]江海燕,朱 华,陈 勇,等.HPLC法分析炮制对虎杖中大黄素影响[J].中成药,2003,25(6):462.

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