超声波提取芹菜总黄酮及鉴别

amy54321 · 发表于 2014-8-17 20:51:14

【摘要】  目的为充分利用芹菜食物资源，避免资源的浪费，探讨芹菜总黄酮的提取及鉴别方法。方法采用超声波乙醇浸提法从芹菜中提取黄酮类物质，对所提取的黄酮类物质进行验证，并用分光光度法测定含量。结果测得样品中总黄酮的含量C=0.2126 mg/ml，回收率为100.3%，其纯度和产率均较高。结论该方法采用全物理过程，无任何污染，是提取芹菜黄酮类物质的有效途径。

【关键词】  超声波提取芹菜总黄酮鉴别

　　The Total Flavanone of Celery Extraction and the Identification by Ultrasonic Wave

　　Abstract：ObjectiveTo make use of the resources of celery，avoid wasting and approach the extraction of total flavanone of celery.MethodsThe flavonoids were extracted by ethanol as the solvent from celery with ultrasonic wave and ethanol extraction .Using spectrophotometry to extract and check the flavanone of celery.ResultsThe density of the total flavanone of celery was C=0.2126 mg/ml and the rate of  recovery was 100.3 %.  The outcome and the purity of the flavanone were all very high .ConclusionThis method is a purely physical process and has not any pollution. It is an ideal way to extract the flavanone of celery.

　　Key words：Ultrasonic wave treatment;  Celery;  Total flavanone;  Identification

芹菜Apium graveolens L．属伞形花科一年生或二年生草本植物，异名药芹、旱芹。芹菜味辛、甘，性凉，营养丰富。已有研究证实，芹菜含有丰富的黄酮类化合物、多不饱和脂肪酸、矿物元素、丁基苯酞类、萜类、香豆素衍生物、叶绿素、氨基酸与维生素、膳食纤维等［1］，其中，黄酮类化合物主要成分为水蓼素及7-甲基水蓼素,医学证明，这2种黄酮类化合物是治疗高血压的有效成分［2］。在药理上，芹菜还具有降压、安神、降血糖、血脂、软化血管、增强免疫力、增进食欲和健胃等药理作用［2］。还可作为神经衰弱、小便热涩不利、月经不调等症的食疗。芹菜中含有大量膳食纤维素，经常食用有促进肠蠕动、防治便秘以及预防大肠癌等［3］。

有文献报道芹菜中总黄酮的提取方法采用乙醇提取［2～4］，但是，这种方法的提取效率仍然较低。近年来，超声技术应用于提取植物中的生物碱、苷类、生物活性物质、动物组织浆的毒质等研究已有报道［5，6］，表明其具有能耗低、效率高、不破坏有效成分的特点。很多研究表明，利用超声波产生的强烈振动、高的加速度、强烈的空化效应、搅拌作用等，可加速植物材料中的有效成分进入溶剂，从而增加有效成分的提取率，缩短提取时间，并且还可避免高温对提取成分的影响［6］。但超声技术应用于提取芹菜中黄酮类物质的研究尚未见报道，本文报道用超声波提取芹菜总黄酮及鉴别。

　　1  仪器与试剂

　　1.1  仪器

　　KQ5200DB型数控超声波清洗器（超声工作频率40kHz、昆山市超声仪器有限公司）；UV755B紫外可见分光光度计（上海分析仪器总厂）；ZF-I型三用紫外分析仪(上海顾村光电仪器厂)；SHBIII循环水式多用真空泵（郑州长城科工贸有限公司）。

　　1.2  试剂

　　95%乙醇AR；亚硝酸钠AR；硝酸铝AR；氢氧化钠AR；三氯化铝AR；盐酸AR；氨水AR；冰醋酸AR；醋酸乙酯AR；芦丁标准品（中国药品生物制品检定所）；新鲜芹菜买自百色市农贸市场。

　　2  方法与结果

　　2.1  总黄酮成分提取

　　取新鲜芹菜，烘干，粉碎。称取芹菜粉末约6 g，加80 ml 95%乙醇，超声波提取2.5 h，抽滤。滤渣再加80 ml 95 %乙醇，超声波提取2.5 h，抽滤，合并两次滤液，减压回收乙醇至滤液仅剩5～7 ml为止，放置100 ml容量瓶中，用60%乙醇稀释至刻度，得样品液。

　　2.2  测定方法依据

　　以芦丁为对照品测定芹菜中总黄酮的含量，加入铝离子试剂，同时控制适宜pH值，使黄酮化合物与铝盐形成络合物，在可见光区能获得稳定的特征吸收峰。

　　2.3  定量实验-总黄酮的含量测定

　　2.3.1  波长的选择取样品液适量，在0.30 ml 5%亚硝酸钠溶液存在的碱性条件下，经硝酸铝显色后，以试剂为空白参比液在420～700 nm波长范围测定络合物的吸光度，络合物于510 nm波长处有最大吸收，故测定时选用此波长。

　　2.3.2  标准曲线的绘制分别精密吸取芦丁对照液（0.13 mg/ml）0.00，0.50，1.00，2.00，3.00，4.00，5.00 ml于10.00 ml容量瓶中，分别加入5%亚硝酸钠溶液0.30 ml，摇匀，静置6 min；再加10%硝酸铝溶液0.30 ml，摇匀，静置6 min；再加4%氢氧化钠溶液4.00 ml，用60%乙醇稀释至刻度，摇匀，静置12 min，以试剂作空白参比液，于510 nm处测定吸光度，结果见表1。表1  紫外可见分光光度计测定吸光度（略）
根据上表得回归方程：A=3.619×103+12.34C，r=0.9 999。

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