玉液汤对大鼠糖尿病的时间治疗学作用研究

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   作者：付雪艳 于福生 董琳 张义伟 马学琴

【摘要】  目的观察玉液汤不同时间给药对糖尿病大鼠的影响，探索合适的用药时间。方法用链脲佐菌素腹腔注射制备糖尿病大鼠模型, 通过正常大鼠与模型大鼠不同时间血糖值的不同，探索1 d中大鼠血糖变化情况，在此基础上，分不同时间给予模型大鼠玉液汤，观察各组大鼠血糖、胰岛素、C肽、甘油三酯、胆固醇等指标的变化。结果玉液汤早组（6：00给药组）在降低血糖、血脂，提高胰岛素和C肽含量方面较玉液汤晚组（18：00给药组）疗效要好。结论玉液汤在治疗糖尿病方面明显受时间因素的影响，通过改变给药时间可以明显提高疗效。

【关键词】  玉液汤； 糖尿病； 时间治疗学

　　The Effect of Yuye Decoction on the Time Therapeutics in Diabetic Rats

　　Abstract：ObjectiveTo observe Yuye Decoction curative effect to different administer time's influence on diabetes rats' blood sugar. We explore the appropriate administer time. MethodsThis experiment made diabetes model through intraperitoneal injection of streptozotocin to rats. At first we explored rats' blood sugar variation in one day passing different value of blood sugar of the healthy rats and the model rats different time . In this foundation, we feed the model rats to Yuye Decoction in different time. After that, we collected the blood sample of different groups of rats through picking the eyeball and observe the change of the blood sugar, the insulin, the C peptide, the glycerin as well as the cholesterol. ResultsThe Yuye Decoction early group (6: 00 gives the medicine group) has better curative effect than the late group (18: 00 gives the medicine group)in some aspects which include in reducing the blood sugar and the blood fats, enhancing the insulin and the C peptide content. ConclusionYuye Decoction is affected obviously by time factor in treating diabetes aspect, and applying the medicine through the different time may enhance obviously the curative effect.

　　Key words：Yuye decoction;   Diabetes ;  Time pharmacology
   
　　玉液汤由清代名医张锡纯创制，具益气滋阴、固肾止渴之功，主要治疗消渴病。现代药理实验及临床［1～7］均证实，玉液汤是治疗糖尿病的有效方剂。本实验在此基础上，应用“时间治疗学”这一现代科学理论，对玉液汤治疗糖尿病进行了系统的用药时间研究，取得了满意的结果。本实验也初步验证了中国古老的时间证治学理论在糖尿病治疗中的应用，为今后临床更好使用本方剂提供实验依据。

　　1  材料与方法

　　1.1  动物Wistar大鼠，体重(200±20)g，雌雄各半，由黑龙江中医药大学实验动物中心提供，动物生产许可证编号：SCXK （黑）20020002。

　　1.2  用药　玉液汤由生山药、生黄芪、知母、生鸡内金、葛根、五味子、天花粉组成，均购于黑龙江中医药大学第二科研门诊部，水煎提取浓缩至每毫升含生药0.828 g，置冰箱保存备用。

　　1.3  试剂链脲佐菌素由美国Sigma公司生产，低温避光保存，现用现配；二甲双胍片购自人民同泰药店，规格0.25 g/片，批号0905006，灌胃时用生理盐水配成混悬液；葡萄糖试剂盒（批号240051，2400111）、甘油三酯试剂盒（批号20043400199）、胆固醇试剂盒（批号20043400199）由中生北控生物科技股份有限公司提供；C肽放射免疫测定试剂盒、胰岛素放射免疫测定试剂盒由北京福瑞生物工程公司提供。

　　1.4  仪器722型分光光度计，上海第三仪器分析厂；DFM－9616管放射性免疫计数器，合肥众成机电技术开发有限责任公司；Lisa 300  plus－全自动生化分析仪，日本日立公司；TGL－16G台式高速离心机，上海医用分析仪器厂。

　　1.5  方法Wistar大鼠60只，体重(200±20)g，雌雄各半，普通饲料适应性饲养7 d，随机分为两组：正常组12只，模型组48只，按标准明暗周期饲养(明期6：00～18：00)。正常组给予正常饮食、饮水；模型组禁食12 h后，腹腔注射2%的链脲佐菌素溶液45 mg/kg，稳定饲养5 d，测定禁食12 h后大鼠血糖。确定模型糖尿病大鼠诊断标准:多饮,多食,多尿,身体消瘦，血糖大于16.7 mol/L。选取模型塑造成功者,随机分为4组：即模型组、玉液汤早组、玉液汤晚组、二甲双胍组。玉液汤早晚组均按8.28 g生药/(kg·d)灌胃，早组每天6：00给药，晚组每天18：00给药；二甲双胍组给予0.45 g/（100 g·d）；模型组和正常组灌胃等容积的生理盐水1 ml/（100 g·d），各组均为1次/d,连续给药21 d。每日观察大鼠的食量、饮水量、体毛状态、活动情况、大便情况及尿量,隔日测体重。

　　2  结果

　　2.1  对一般情况的影响各组大鼠于给药前、后测定体重，除正常组体重有所升高外，其余各组均有不同程度降低，以模型组降低最为明显；正常组大鼠于整个实验过程中饮食、活动、毛色均正常，其余各组自腹腔注射链脲佐菌素后，均有不同数量死亡，饮水、摄食及尿量均有不同程度增加，而且毛无光泽，甚至枯黄，活动减少，明显消瘦，这些症状尤以模型组更加明显。　2.2  对大鼠血糖情况的影响 给药前及末次给药后，自大鼠目内眦静脉丛取血，离心机3 000 r/min,离心10 min，分离血清，借助于葡萄糖试剂盒在分光光度计上按规定方法测定大鼠血糖，各组大鼠血糖情况见表1。

　　2.3  对大鼠胰岛素、C肽水平的影响  末次给药后，大鼠摘眼球取血，离心机3 000 r/min,离心15 min，取上层血清采用放射免疫方法测定胰岛素、胰高血糖素及C肽。结果见表2。

　　表1  给药前后各组大鼠血糖比较（略）

　　与模型组比较，▲P＜0.01,▲▲P＞0.05；与玉液汤早组比较，△P＜0.05

　　表2  各组大鼠胰岛素及C肽情况（略）

　　与模型组比较，▲P＜0.001；与玉液汤早组比较，△P＜0.001

　　2.4  对大鼠血脂、胆固醇水平的影响 借助甘油三酯、胆固醇试剂盒在全自动生化分析仪上测定各组大鼠末次给药后甘油三酯、总胆固醇。结果见表3。

　　表3  各组大鼠甘油三酯及胆固醇情况（略）

　　与模型组比较，▲P＜0.01，▲▲P＜0.05；与玉液汤早组比较，△P＜0.01，△△P＞0.05

　　3  讨论
     
　　时间治疗学，是根据医药学结合生物在生命活动过程中所表现出的周期性时间节律，来研究疾病的发生，分析病机的变化以及辨别症候、防治疾病的一门医学科学。其优点在于正确的给药时间不但可以提高药效，而且可以降低副作用。近年来大量的临床和实验研究都证明了玉液汤在糖尿病中医药治疗中的重要作用。但现今没有关于玉液汤治疗糖尿病的时间治疗学方面的研究，这不利于临床上更好发挥玉液汤治疗糖尿病的作用，故本实验选择玉液汤治疗糖尿病的时间治疗学作用作为出发点，为进一步深入研究提供参考。
   
　　本实验在研究玉液汤治疗糖尿病机理基础上又侧重于玉液汤治疗糖尿病的时间治疗学的研究，实验研究表明：对于链脲佐菌素造模的糖尿病大鼠，玉液汤早晚组均可以明显降低其血糖值，增加胰岛素、C肽的分泌，降低胰高血糖素的含量，并且可以改善糖尿病大鼠的血脂代谢情况。玉液汤早组对糖尿病大鼠的血糖、胰岛素、C肽以及甘油三酯改善较玉液汤晚组尤为明显。由此可以证明玉液汤在不同时间给予，疗效存在差异，为临床更加有效应用玉液汤治疗糖尿病提供了实验依据。本课题仅仅初步探讨了玉液汤治疗糖尿病的时间药理学作用，其时间治疗的本质及机理还有待更深一步的研究。

【参考文献】
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　　［2］ 吴晋峰.加减玉液汤治疗糖尿病51例［J］.河南中医，2002，22（9）：60.

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　　［4］ 石景洋，刘焕华.加味玉液汤对2型糖尿病骨代谢紊乱的影响［J］.中国临床康复,2003，30（7）：4166.

　　［5］ 黄国荣.金津玉液汤治疗2型糖尿病临床观察［J］.湖北中医杂志,2004,26(12):291.

　　［6］ 黎同明,全世建.加味玉液汤治疗气阴两虚型2型糖尿病78例［J］.陕西中医,2005，26（6）：484.

　　［7］ 朱敏英.玉液汤对糖尿病模型大鼠的治疗作用研究［J］.中药药理与临床,2005,21(3)：52.