高效液相法测定复方呋喃唑酮灌肠液中盐酸普鲁卡因的含量

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【摘要】  目的建立高效液相色谱（HPLC）法测定复方呋喃唑酮灌肠液中盐酸普鲁卡因的含量。方法建立高效液相色谱（HPLC）法测定复方呋喃唑酮灌肠液中盐酸普鲁卡因的含量。结果盐酸普鲁卡因在10.48～52.40 μg·ml－1浓度范围内线性关系良好，r＝0.999 9，回收率（n＝9）为100.1%（RSD＝1.1%）。结论该方法灵敏度高，线性范围广，具有较高的专属性，快速简便，重现性好，适合于该制剂的含量测定和质量控制。

【关键词】  复方呋喃唑酮灌肠液 含量测定 高效液相色谱法


    复方呋喃唑酮灌肠液为我院治疗急、慢性结肠炎的经验方（070201，070202，070203），由呋喃唑酮、盐酸普鲁卡因等常用药组成，配伍合理，疗效确切，应用方便且无明显不良反应。目前，复方呋喃唑酮灌肠液质量标准中尚无盐酸普鲁卡因的含量测定质量控制，笔者应用高效液相色谱法测定复方呋喃唑酮灌肠液中盐酸普鲁卡因的含量，取得满意效果，现报道如下。

　　1  仪器与试药

    美国科学系统公司SSI高效液相色谱仪；梅特勒AG135电子天平；盐酸普鲁卡因对照品（含量99.3%）。复方呋喃唑酮灌肠液（自制，批号：070201，070202，070203）。甲醇为色谱纯；水为重蒸水，其他试剂均为分析纯。

　　2  方法与结果

　　2.1  色谱条件与系统适应性实验

　　色谱柱为Dimonsil C18色谱柱(5μm, 4.6 mm×250 mm)；流动相为甲醇-0.06%己烷磺酸钠溶液（含1.2%冰醋酸与0.12%三乙胺）（75∶25）；流速为1 ml·min－1；检测波长为290 nm；柱温30℃；进样量为10μl。分别吸取盐酸普鲁卡因溶液、空白样品溶液和供试品溶液各10μl注入色谱仪，记录色谱图。在本条件下，空白样品中其他组分不干扰盐酸普鲁卡因的测定，专属性好，符合规定［1］。

　　2.2  线性关系考察

　　精密称取盐酸普鲁卡因约10 mg，置50 ml量瓶中，加甲醇40 ml，超声波处理15 min使溶解后定容至刻度，摇匀，分别取5，4，3，2，1 ml加流动相稀释至25 ml，摇匀，制成系列对照品溶液。分别进样10 ul，测定峰面积，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标进行线性回归，线性方程：A =74 594C+8 540.2 (r = 0.999 9，n=5)。

　　2.3  回收率实验  
　　
　　取空白样品9份，分别精密加入盐酸普鲁卡因适量（约相当于制剂中盐酸普鲁卡因含量的80%，100%，120%），照含量测定项下方法依法测定盐酸普鲁卡因含量，计算回收率，结果见表1.表1  回收率试验结果（略）

　　2.4  样品测定

　　精密量取本品10 ml，置50 ml量瓶中，用甲醇溶解后稀释至刻度，摇匀，精密量取2 ml，置25 ml量瓶中用流动相稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。取供试品溶液10μl注入液相色谱仪，记录色谱图。另精密称取普鲁卡因对照品10 mg，置50 ml量瓶中，用甲醇溶解后稀释至刻度，摇匀，精密量取2 ml，置25 ml量瓶中用流动相稀释至刻度，摇匀，同法测定，按外标法以峰面积计算，即得。结果批号为070201，070202，070203的复方呋喃唑酮灌肠液中盐酸普鲁卡因的标示含量分别为95.8%，96.2%，94.9%。结果见表2。表2  样品含量测定结果（略）

　　2.5  精密度实验

　　取样品测定项下的对照品溶液，照样品测定项下的方法，重复进样6次，测定峰面积，盐酸普鲁卡因的RSD＝0.45%，结果表明，本法具有良好的精密度。【摘要】  目的建立高效液相色谱（HPLC）法测定复方呋喃唑酮灌肠液中盐酸普鲁卡因的含量。方法建立高效液相色谱（HPLC）法测定复方呋喃唑酮灌肠液中盐酸普鲁卡因的含量。结果盐酸普鲁卡因在10.48～52.40 μg·ml－1浓度范围内线性关系良好，r＝0.999 9，回收率（n＝9）为100.1%（RSD＝1.1%）。结论该方法灵敏度高，线性范围广，具有较高的专属性，快速简便，重现性好，适合于该制剂的含量测定和质量控制。

【关键词】  复方呋喃唑酮灌肠液 含量测定 高效液相色谱法


    复方呋喃唑酮灌肠液为我院治疗急、慢性结肠炎的经验方（070201，070202，070203），由呋喃唑酮、盐酸普鲁卡因等常用药组成，配伍合理，疗效确切，应用方便且无明显不良反应。目前，复方呋喃唑酮灌肠液质量标准中尚无盐酸普鲁卡因的含量测定质量控制，笔者应用高效液相色谱法测定复方呋喃唑酮灌肠液中盐酸普鲁卡因的含量，取得满意效果，现报道如下。

　　1  仪器与试药

    美国科学系统公司SSI高效液相色谱仪；梅特勒AG135电子天平；盐酸普鲁卡因对照品（含量99.3%）。复方呋喃唑酮灌肠液（自制，批号：070201，070202，070203）。甲醇为色谱纯；水为重蒸水，其他试剂均为分析纯。

　　2  方法与结果

　　2.1  色谱条件与系统适应性实验

　　色谱柱为Dimonsil C18色谱柱(5μm, 4.6 mm×250 mm)；流动相为甲醇-0.06%己烷磺酸钠溶液（含1.2%冰醋酸与0.12%三乙胺）（75∶25）；流速为1 ml·min－1；检测波长为290 nm；柱温30℃；进样量为10μl。分别吸取盐酸普鲁卡因溶液、空白样品溶液和供试品溶液各10μl注入色谱仪，记录色谱图。在本条件下，空白样品中其他组分不干扰盐酸普鲁卡因的测定，专属性好，符合规定［1］。

　　2.2  线性关系考察

　　精密称取盐酸普鲁卡因约10 mg，置50 ml量瓶中，加甲醇40 ml，超声波处理15 min使溶解后定容至刻度，摇匀，分别取5，4，3，2，1 ml加流动相稀释至25 ml，摇匀，制成系列对照品溶液。分别进样10 ul，测定峰面积，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标进行线性回归，线性方程：A =74 594C+8 540.2 (r = 0.999 9，n=5)。

　　2.3  回收率实验  
　　
　　取空白样品9份，分别精密加入盐酸普鲁卡因适量（约相当于制剂中盐酸普鲁卡因含量的80%，100%，120%），照含量测定项下方法依法测定盐酸普鲁卡因含量，计算回收率，结果见表1.表1  回收率试验结果（略）

　　2.4  样品测定

　　精密量取本品10 ml，置50 ml量瓶中，用甲醇溶解后稀释至刻度，摇匀，精密量取2 ml，置25 ml量瓶中用流动相稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。取供试品溶液10μl注入液相色谱仪，记录色谱图。另精密称取普鲁卡因对照品10 mg，置50 ml量瓶中，用甲醇溶解后稀释至刻度，摇匀，精密量取2 ml，置25 ml量瓶中用流动相稀释至刻度，摇匀，同法测定，按外标法以峰面积计算，即得。结果批号为070201，070202，070203的复方呋喃唑酮灌肠液中盐酸普鲁卡因的标示含量分别为95.8%，96.2%，94.9%。结果见表2。表2  样品含量测定结果（略）

　　2.5  精密度实验

　　取样品测定项下的对照品溶液，照样品测定项下的方法，重复进样6次，测定峰面积，盐酸普鲁卡因的RSD＝0.45%，结果表明，本法具有良好的精密度。【摘要】  目的建立高效液相色谱（HPLC）法测定复方呋喃唑酮灌肠液中盐酸普鲁卡因的含量。方法建立高效液相色谱（HPLC）法测定复方呋喃唑酮灌肠液中盐酸普鲁卡因的含量。结果盐酸普鲁卡因在10.48～52.40 μg·ml－1浓度范围内线性关系良好，r＝0.999 9，回收率（n＝9）为100.1%（RSD＝1.1%）。结论该方法灵敏度高，线性范围广，具有较高的专属性，快速简便，重现性好，适合于该制剂的含量测定和质量控制。

【关键词】  复方呋喃唑酮灌肠液 含量测定 高效液相色谱法


    复方呋喃唑酮灌肠液为我院治疗急、慢性结肠炎的经验方（070201，070202，070203），由呋喃唑酮、盐酸普鲁卡因等常用药组成，配伍合理，疗效确切，应用方便且无明显不良反应。目前，复方呋喃唑酮灌肠液质量标准中尚无盐酸普鲁卡因的含量测定质量控制，笔者应用高效液相色谱法测定复方呋喃唑酮灌肠液中盐酸普鲁卡因的含量，取得满意效果，现报道如下。

　　1  仪器与试药

    美国科学系统公司SSI高效液相色谱仪；梅特勒AG135电子天平；盐酸普鲁卡因对照品（含量99.3%）。复方呋喃唑酮灌肠液（自制，批号：070201，070202，070203）。甲醇为色谱纯；水为重蒸水，其他试剂均为分析纯。

　　2  方法与结果

　　2.1  色谱条件与系统适应性实验

　　色谱柱为Dimonsil C18色谱柱(5μm, 4.6 mm×250 mm)；流动相为甲醇-0.06%己烷磺酸钠溶液（含1.2%冰醋酸与0.12%三乙胺）（75∶25）；流速为1 ml·min－1；检测波长为290 nm；柱温30℃；进样量为10μl。分别吸取盐酸普鲁卡因溶液、空白样品溶液和供试品溶液各10μl注入色谱仪，记录色谱图。在本条件下，空白样品中其他组分不干扰盐酸普鲁卡因的测定，专属性好，符合规定［1］。

　　2.2  线性关系考察

　　精密称取盐酸普鲁卡因约10 mg，置50 ml量瓶中，加甲醇40 ml，超声波处理15 min使溶解后定容至刻度，摇匀，分别取5，4，3，2，1 ml加流动相稀释至25 ml，摇匀，制成系列对照品溶液。分别进样10 ul，测定峰面积，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标进行线性回归，线性方程：A =74 594C+8 540.2 (r = 0.999 9，n=5)。

　　2.3  回收率实验  
　　
　　取空白样品9份，分别精密加入盐酸普鲁卡因适量（约相当于制剂中盐酸普鲁卡因含量的80%，100%，120%），照含量测定项下方法依法测定盐酸普鲁卡因含量，计算回收率，结果见表1.表1  回收率试验结果（略）

　　2.4  样品测定

　　精密量取本品10 ml，置50 ml量瓶中，用甲醇溶解后稀释至刻度，摇匀，精密量取2 ml，置25 ml量瓶中用流动相稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。取供试品溶液10μl注入液相色谱仪，记录色谱图。另精密称取普鲁卡因对照品10 mg，置50 ml量瓶中，用甲醇溶解后稀释至刻度，摇匀，精密量取2 ml，置25 ml量瓶中用流动相稀释至刻度，摇匀，同法测定，按外标法以峰面积计算，即得。结果批号为070201，070202，070203的复方呋喃唑酮灌肠液中盐酸普鲁卡因的标示含量分别为95.8%，96.2%，94.9%。结果见表2。表2  样品含量测定结果（略）

　　2.5  精密度实验

　　取样品测定项下的对照品溶液，照样品测定项下的方法，重复进样6次，测定峰面积，盐酸普鲁卡因的RSD＝0.45%，结果表明，本法具有良好的精密度。2.6  日内精密度实验

　　取样品测定项下的供试品溶液，放置0，1，2，4，8h测定，峰面积基本无变化，RSD＝0.75%（n＝5）。结果表明日间精密度良好，同时本品的测定溶液在8 h内基本稳定。

　　2.7  重复性实验

　　取同一批号样品5份，精密称定，按样品测定项下方法测定，计算盐酸普鲁卡因含量，RSD为1.2%（n＝5），结果表明，本法具有良好的重复性。

　　3  讨论

　　3.1  色谱条件的选择及系统适应性

　　采用高效液相色谱法，参考有关文献对流动相进行摸索和筛选［2，3］，笔者用甲醇-0.06%己烷磺酸钠溶液（含1.2%冰醋酸与0.12%三乙胺）（75∶25）作流动相，盐酸普鲁卡因与制剂中的其他成分达到良好分离，且盐酸普鲁卡因的峰形良好，能很好满足定量要求。

　　3.2  溶剂的选择

　　盐酸普鲁卡因在水中易溶，在乙醇中略溶，在三氯甲烷中微溶，在乙醚中几乎不溶［4］。结合流动相综合考虑，选用甲醇作为溶剂。实验中用甲醇作为溶剂处理试品溶液，简单易行，操作简便。

【参考文献】
  　　［1］李淑凤.HPLC法同时测定盐酸普鲁卡因注射液中主成分盐酸普鲁卡因及杂质对氨基苯甲酸含量［J］.天津药学，2005，17（5）：12.

　　［2］张林松，谢东浩，吴 琳.反相高效液相色谱法测定普链合剂中盐酸普鲁卡因的含量［J］.江苏大学学报（医学版），2005，15（2）：163.

　　［3］张国宏.HPLC测定盐酸普鲁卡因葡萄糖注射液中盐酸普鲁卡因和对氨基苯甲酸的含量［J］.中国药师，2006，9（4）：374.

　　［4］国家药典委员会.中国药典，Ⅱ部［S］.北京：化学工业出版社，2005：580.