芩玄胶囊提取工艺研究

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【摘要】  目的通过对芩玄胶囊提取工艺的研究，寻求芩玄胶囊的最佳提取条件。方法以黄芩苷为指标，高效液相色谱（HPLC）法为含量测定方法，采用正交设计法，优化芩玄胶囊的提取工艺。结果加水量、提取次数具有显著性差异（P<0.05）。结论 芩玄胶囊采提取工艺为：用水提法，即用药材重量的8倍水量，提取3次，每次提取时间为1h。

【关键词】  芩玄胶囊 黄芩苷 提取工艺 高效液相色谱法


　　Study on Extraction Technology of Qinxuan Capsules

　　Abstract：ObjectiveTo seek optimum extraction conditions of Qinxuan Capsules by studying on extraction process. MethodsThe optimum extraction regards baicalin as the index. It was investigated by the orthogonal design and determined by HPLC. ResultsThe influence of water consumption, draw number of times had remarkable difference （P<0.05）. ConclusionThe optimum extraction process of Qinxuan Capsules obtained is that sliced medicinal herbs are extracted, with water for 3 times, with the solvent volume 8 times amount and extraction time 1 hours each time.

　　Key words：Qinxuan Capsules;   Baicalin;   Extraction process;   HPLC

    芩玄胶囊为医院制剂，由黄芩、玄参、麦冬等组成，具有清热除湿、消肿止痛的功效，用于阴虚火旺，虚火上浮，口鼻干燥，咽喉肿痛等。其主要成分黄芩为唇形科植物黄芩（Scutellaria baicalensis Georgi）的干燥根，味苦性寒，具有清热燥湿、泻火解毒、滋阴疏表的功效，其主要有效成分为黄酮类化合物，现代药理研究证明黄芩具有明显的抗菌、抗炎、抗过敏、抗氧化、抗癌和抗病毒等作用，临床上用于治疗肺热咳嗽、烦渴、热病烦躁、湿热痢疾、痈肿疮毒、湿热痞满等疾病。为了筛选最佳提取工艺，提高其临床疗效，本实验采用正交设计实验方法进行了黄芩最佳提取条件的考察，结果稳定可靠。

　　1  试剂与仪器

    黄芩（购自亳州汤东药业有限公司，批号200504024）；黄芩苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号：110715-200308）。水为重蒸水，磷酸为色谱纯，甲醇为分析纯。

    高效液相色谱仪（Waters公司）；电子精密天平BS110S 90836500（Sartorius公司）；JD300-3型 电子天平（沈阳龙腾电子称量仪器有限公司）。

　　2  方法与结果

　　2.1  含量测定方法［1，2］

　　2.1.1  色谱条件色谱柱为SB-C18（ZORBX），（4.6 mm×150 mm，5 μm）；流动相为甲醇-水-磷酸（47∶53∶0.2）；流速1.0 ml/min；检测波长278 nm；柱温为室温。

　　2.1.2   黄芩苷对照品溶液的制备

　　精密称取黄芩苷对照品6 mg，甲醇定容于10 ml容量瓶中，作为对照品溶液Ⅰ（0.6 mg/ml）；再精密吸取对照品溶液Ⅰ 1 ml，用甲醇定容于10 ml容量瓶中，作为对照品溶液Ⅱ（60 μg/ml）。

　　2.1.3  供试品溶液的制备

　　取芩玄胶囊0.8 g，精密称定，加甲醇40 ml，超声提取30 min，放冷，滤过，滤液置100 ml 量瓶中，用少量甲醇分次洗涤容器和残渣，洗液滤入同一量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀。精密量取1 ml，置10 ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀备用。

　　2.1.4  线性关系的考察

　　精密吸取对照品溶液Ⅰ 0.5，1，2，3，4，5 ml，用甲醇定容于10 ml容量瓶中，进样10 μl，以上述色谱条件测定。以峰面积（对进样量进行线性回归，方程为：Y=4 215.236X+3.875（r=0.999 9），黄芩苷进样量在0.30～3.0 μg范围内呈良好线性关系。　2.1.5  精密度考察

　　取对照品溶液Ⅱ，连续进样6次，峰面积测定值RSD为0.78%，表明仪器精密度良好。

　　2.1.6  稳定性考察

　　在0.5，1，2，4，6，12  h内每隔一定时间测定对照品溶液Ⅱ的峰面积，其测定值RSD为0.84%（n=5），表明对照品在12 h内稳定。

　　2.1.7  重现性考察

　　取同一批供试品，按供试品溶液的制备方法重复5次，制备供试品并测定黄芩苷含量，结果RSD均<2%，表明重现性良好。

　　2.2  正交实验设计法筛选黄芩苷最佳提取条件方法

　　2.2.1  按处方取符合《中国药典》规定的各味药材共100 g，正交试验设计以提取的黄芩苷含量为考察指标，对加水量（A）、提取次数（B）、提取时间（C）等指标进行考察。加水量A：最少加水量为浸过药材药面的量。提取次数B：按分配原理，取2，3，4次3个水平。提取时间C：依经验，取1.0，1.5，2.0 h 3个水平。

    最低加水量确定：取上述药材提取1 h，调整水量使水浸过药面时称重，加入水量为380 g，则最少加溶媒量为药材的3.8倍，取整数为4倍量。设计L9（34）因素水平见表1～2。表1   正交试验因素水平（略）表2  正交实验结果（略）

　　2.2.2   供试品中黄芩苷的含量测定

　　供试品以及对照品依次进样5 μl，测定，采用外标法计算黄芩苷的含量，Excel进行直观分析，结果见表3，并采用SPSS13.0进行方差分析，结果见表3～4。表3   干膏重方差分析结果（略）表4  黄芩苷含量方差分析结果（略）

    黄芩苷含量直观结果分析表明，黄芩提取的影响因素为B>A>C。方差分析显示：A、B因素影响具有显著差异（P<0.05），选A3B3，C因素影响无显著差异（P>0.05），选C1，最佳条件为A3B3C1；干膏重结果直观分析表明，黄芩提取的影响因素为B>A>C。方差分析显示：A因素影响具有显著差异（P<0.05），B因素影响具有非常显著差异（P<0.01），C因素影响无显著差异（P>0.05）。

    以黄芩苷含量结果为主，结合干膏重结果分析，可以看出由于A2与A3、B2与B3相差不大，考虑工艺生产中成本等因素，选择提取条件为A2B2C1，即提取工艺为：加药材重量的8倍水量，提取3次，每次提取时间为1 h。

　　2.3  优化条件的重复性实验按筛选的条件进行了3次重复性实验，测得的黄芩苷的含量基本一致，证明该工艺提取率高，稳定性好。

　　3  结论

    提取及精制实验结果表明芩玄胶囊采用水提法，即用药材重量的8倍水量，提取3次，每次提取时间为1 h。重复性实验结果显示：该工艺提取率高，稳定性好。

    本实验参照《中国药典》2005年版Ⅰ部HPLC法测定黄芩苷含量的色谱条件。我们利用DAD检测器对此进行了考察，发现黄芩苷峰面积在278 nm处大于280 nm处，故选择278 nm为检测波长，而系统适用性实验结果符合要求。



【参考文献】
  　　［1］国家药典委员会.中国药典，Ⅰ部［S］.北京：化学工业出版社，2005：248.

　　［2］李学斌，秦伟华.黄芩及双黄连注射液中黄芩苷含量测定［J］.中成药，1992，14（8）：1.