速效烧伤油质量标准的研究

amy54321

【摘要】  目的制定速效烧伤油的质量标准。方法用薄层色谱（TLC）法鉴别大黄，分光光度法测定制剂中总蒽醌的含量。结果平均回收率为97.62%，RSD=1.60%（n=5）。结论该方法灵敏、准确、重现性好，可作为速效烧伤油的质量控制指标之一。

【关键词】  质量标准 大黄 速效烧伤油 总蒽醌 分光光度法

　　　　Abstract:ObjectiveTo establish the quality standard of SuXiaoShaoShangYou. MethodsRadix et rhizoma rhei was identified by thin-layer chromatography（TLC）. The content of total anthraquinones was determined by visible spectrophometry. ResultsThe average recovery of the sample was 97.62%, RSD was 1.60%（n=5）.ConclusionThis method is sensitive, accurate and can be used as a quality control for the preparation of  SuXiaoShaoShangYou.

　　Key wordsuality standard;  Rhubarb；  SuXiaoShaoShangYou;  Total anthraquinones；  Spectrophotography

    速效烧伤油是中国人民解放军海军医学研究所新药研究中心研制的一种中药复方制剂，以民间验方为基础，由大黄、冰片、赤芍等组成，具有祛风除湿、活血祛淤、杀菌消炎、清热解毒、消肿止痛等功用。为了保证该药物的质量稳定和可控，现对其质量标准进行研究，从而为速效烧伤油制备工艺的优化和质量标准的建立提供科学数据和方法。

　　1  仪器与试药

    Varian Cary-100紫外可见分光光度仪（美国Varian公司），TG328B型电光分析天平（上海天平厂），减压蒸发仪（上海申生科技有限公司），甲醇、氯仿、醋酸镁、甲酸乙酯等试剂均为上海试剂厂试剂，规格为分析纯，大黄素对照品（中国药品生物制品检定所）；速效烧伤油，由中国人民解放军海军医学研究所新药研究中心自制。

　　2  方法与结果

　　2.1  鉴别

　　2.1.1  性状鉴别本品为棕色油状液体，有冰片的特殊气味。

　　2.1.2  化学鉴别取本品1 ml，加入5 ml甲醇溶液，充分振摇，过滤，取甲醇过滤液，滴在滤纸上，干燥后喷以0.5%的醋酸镁甲醇溶液，于80℃加热5 min，显棕色。取本品1 ml，加入5 ml甲醇溶液，充分振摇，过滤，取甲醇过滤液1滴，加入25%Na2CO3水溶液，4%HCHO及5%邻二硝基苯溶液各1滴，混合后置水浴上加热，在1～4 min内产生紫色。

　　2.1.3  薄层鉴别取本品1 ml，加甲醇5 ml，置水浴上搅拌使充分溶解，放冷，滤过，重复操作3次，合并滤液，滤液浓缩，作为供试品液。另取大黄素标准品，加甲醇制成每毫升含0.5 mg的溶液，作为对照溶液。照薄层色谱法［1］实验。吸取供试品10 μl，对照品溶液4 μl，分别交叉点于同一硅胶GF254薄层板上，以石油醚∶甲酸乙酯=5∶3为展开剂，展开，取出，晾干，置氨蒸气中熏后，日光下检视，斑点变为红色。见图1。

　　2.2  检查

　　2.2.1  装量照最低装量检查法［1］检查，符合规定。

　　2.2.2  微生物限度照微生物限度检查法［1］检查，符合规定。

　　2.3  含量测定

　　2.3.1  对照品溶液的制备精密称取大黄素对照品适量，用甲醇制成50 μg/ml的溶液，摇匀，即得。

　　2.3.2  供试品溶液的制备 精密量取本品1 ml，加入5 ml甲醇充分萃取，分取上层液，同法用甲醇提取共5次，合并甲醇液，50℃减压蒸发至干。向其中加入 0.5%醋酸镁甲醇溶液适量，使充分显色，然后完全转移在10 ml 容量瓶，同法操作3次，合并转移，最后用0.5%醋酸镁甲醇溶液定容，作为储备液。从储备液中精密量取1ml，用0.5%醋酸镁甲醇溶液稀释并定容至5 ml容量瓶，作为供试品溶液，待测。2.3.3  阴性对照溶液的制备精密量取缺大黄药材的供试品1ml，按供试品溶液的制备方法平行操作“加入5 ml 甲醇…，定容至5 ml容量瓶”，作为阴性对照溶液，备用。

　　2.3.4  测定法取供试品溶液，按紫外分光光度法［1］在510 nm波长处测定吸收度，从标准曲线计算出供试品液中游离总蒽醌的含量。

　　2.3.5  标准曲线的绘制精密吸取大黄素对照品溶液分别为1，2，3，4，5 ml，分别置蒸发皿中，水浴挥干。然后加入0.5%醋酸镁甲醇溶液适量使溶解，转移至10 ml容量瓶中定容，摇均，同时作空白。照紫外分光光度法［1］，在510 nm波长处测定吸收值，以浓度为横坐标，吸收度为纵坐标，绘制标准曲线，回归方程为Y=0.005X，r=0.999 3，大黄素在50～250 μg范围线性关系良好。

　　2.3.6  精密度实验精密吸取已制备好的供试品溶液，用紫外分光光度计测定其吸光度值，连续测定3次，分别记录其吸光度值，其日内精密度为RSD=1.47%，其日间精密度为2.76%。

　　2.3.7  稳定性实验取供试品溶液，分别于5，10，20，30，40，50，60  min依法测定，记录其吸光度值，RSD=1.22%。表明在1 h内溶液稳定。

　　2.3.8  重复性实验精密吸取速效烧伤油1 ml，按“供试品溶液制备”依法操作，共5份，然后在紫外分光光度计，测其吸光度值，总蒽醌含量为263 μg/ml，RSD=1.90%。

　　2.3.9  加样回收率实验精密量取已知含量的样品溶液1 ml及大黄素对照品溶液1 ml（n=5），按样品“测定法”依法测定，平均回收率为97.62%，RSD=1.60%。

　　2.3.10  样品测定取自制的3批样品，按上述供试品溶液方法进行制备，按紫外分光光度法［1］，在510 nm波长处测定吸收度，从标准曲线计算出供试品液中游离总蒽醌的含量。3批样品的平均含量分别为 263，275，290 μg/ml。

　　3  讨论

    大黄为速效烧伤油这一复方制剂的主要成分，因此在本药中对大黄进行薄层鉴别，并对其中所含总蒽醌类［2］的含量作为其含量测定的评价指标。由薄层鉴别图谱可知，在与大黄素对照品相同位置上显相同颜色的斑点，而所制备的阴性样品在此相应位置上未有斑点显示。本研究根据大黄蒽醌类化合物能与醋酸镁反应生成络合物的原理，利用分光光度法对其进行含量测定，该方法具有简便快速，重现性好，在50～250 μg/ml范围内线性良好，该质量标准的制定为新药的申报奠定基础。

【参考文献】
  　　［1］国家药典委员会.中国药典，Ⅰ部［S］.北京：化学工业出版社，2000：附录33，附录ⅥB，附录ⅫC，附录ⅩⅢC，附录ⅩⅢ，附录ⅤA，附录ⅤB.

　　［2］王 耕，卢慧勤.胃灵片中大黄总蒽醌的含量测定［J］.广州医高专学报，1999，22（2）：120.