HPLC法测定宁夏产四种柴胡中kaerophyllin的含量

打盹的憨包子

摘要　HPLC法测定宁夏产四种柴胡中木脂素类成分(kaerophyllin)的含量，用甲醇提取后进样。色谱条件：ODS-C18柱 (150mm×6mm)，流动相为甲醇-水(70∶30)，测定波长328nm。结果表明宁夏产小叶黑柴胡、短茎柴胡、空心柴胡、秦岭柴胡中均含有 kaerophyllin。

关键词：HPLC法；kaerophyllin；宁夏产柴胡

　　我国有20余种柴胡属植物供药用，宁夏有10种〔1〕均含有柴胡皂苷a.d。小叶黑柴胡中有较高含量的木脂素类成分，是区别于北柴胡的显著特点〔2〕。为系统地考察柴胡的质量，笔者对宁夏产四种柴胡中Kaerophyllin进行了含量测定。

1　仪器与试药

1.1　仪器　LC-6A高效液相色谱仪(日本)。

1.2　试药　Kaerophyllin(日本东邦大学药学部分离，经UV，IR，MS，1H-NMR，13C-NMR鉴定)；柴胡〔采集于宁夏固原县，宁夏药品检验所邢世瑞主任药师鉴定为：北柴胡(B.chinense DC)，小叶黑柴胡(B.smithii wolff var.parvifolium Shan et Y.Li)，短茎柴胡(B.pusillum Krylov)，空心柴胡(B.longicaule var.franchelii Boiss)，秦岭柴胡(B.longicaule var.giraldii wolff)〕。

2　方法与结果

2.1　色谱条件　色谱柱Shimpack CLC-ODS-C18(150mm×6mm)，流动相：甲醇-水(70∶30)，流速1ml/min，进样量15μl，检测波长328nm。

2.2　标准曲线　精密称取Kaerophyllin 5mg，用甲醇溶解定容于10ml量瓶中，制成标准溶液；精密吸取2，6，10，14，18μl注入高效液相色谱仪，以进样量对峰高回归得方程为 Y＝0.065＋0.346C(r＝0.9961)，线性范围为1～9μg。

2.3　回收率试验　精密称取北柴胡粉末0.5g，加入Kaerophyllin 1.0260mg，用甲醇25ml 40℃温浸20min后，超声提取30min，过滤；重复两次，挥去甲醇，再用甲醇4ml溶解后；过滤，置5ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，微孔滤膜过滤(0.45μm)；取滤液进样15μl，计算回收率为97.1%，RSD＝2.1%(n＝5)。
2.4　样品含量测定　精密称取4种柴胡粉末各0.5g。用甲醇25ml 40℃温浸20min后，按上述条件进行样品制备和含量测定，结果见图1、表1。

3　小结

　　宁夏产小叶黑柴胡、短茎柴胡、秦岭柴胡、空心柴胡均含有Kaerophyllin，且含量较高，北柴胡中只有痕量。该实验对综合评价柴胡的质量具有参考价值。

表1　各柴胡中Kaerophyllin的含量(n＝5)

药　　材 Kaerophyllin(%) 北柴胡 痕量 小叶黑柴胡 0.53 短茎柴胡 0.76 秦岭柴胡 0.39 空心柴胡 0.21


A-kaerophyllin　B-小叶黑柴胡　C-短茎柴胡
D-空心柴胡　E-秦岭柴胡

参考文献

〔1〕　邢世瑞主编.宁夏中药资源.银川：宁夏人民出版社，1987：47
〔2〕　尚明远，袁本香，王英华，等.HPLC法测定宁夏产柴胡中柴胡皂苷a.d的含量.西北药学杂志，1998，13(4)：153
〔3〕　王英华，尚明远，邢世瑞，等.小叶黑柴胡化学成分比较研究简报.宁夏医学杂志，1996，18(增刊)：9